LABORATORIO PATOLÓGICO SAN ISIDRO

OSTEOSARCOMA Y CITOLOGÍA: UN HUESO NO TAN DURO DE ROER..!!

2011-07-07T11:17:00.000-07:00

(Fig. 1.- Osteosarcoma en radio. típica lesión de hueso "apolillado")

Las lesiones neoplásicas en huesos de pequeños animales no son ajenas a nuestra práctica diaria. Se sabe que los tumores de origen esquelético representan el 3% o 4% de las neoplasias malignas en caninos. De igual forma, se ha calculado que el 80% de los tumores óseos son osteosarcomas. Los huesos largos de razas gigantes como los molosoides, pastores alemanes, setter irlandes, labradores, golden retriever son los que se ven afectados con mayor frecuencia. Con menor frecuencia los huesos del cráneo pueden estar involucrados en casos de osteosarcoma. De igual forma se conoce que cualquier raza canina puede verse afectada. Los felinos pueden padecer de esta neoplasia aunque con menor frecuencia.
El origen exacto del tumor aún se desconoce aunque hay cierto concenso en que la causa más probable se deba a microfracturas crónicas debido al peso y tipo de actividad del canino. La edad promedio de aparición es de 07 años con mayor número de casos en pacientes machos. Los miembros anteriores se ven afectados en la epífisis distal del radio o en la diáfisis del húmero, mientras que en los miembros posteriores se ven afectados la epífisis distal del fémur y la epífisis proximal de la tibia.
Los pacientes afectados llegan a consulta con claudicación parcial, abultamiento por congestión y edema, dolor a la palpación y algunas veces temperatura alta.

(Fig. 2.- Osteosarcoma en radio. Nótese el tamaño de la masa hacia la piel y la fractura del hueso)

Toma de muestra para estudio citológico

Cuando evaluamos el sistema musculoesquelético mediante citología podemos pensar que es más factible obtener un buen número de muestras adecuadas de tejido muscular por ser un tejido más blando y accesible. En el lado opuesto nos encontramos con el hueso, al ser un tejido con una matrix muy dura nos resulta difícil pensar que podamos acceder a una muestra "decorosa" para el estudio citológico. La realidad nos ha probado innumerables veces que sucede todo lo contrario. El músculo esquelético posee uniones muy fuertes y a pesar de poder acceder con facilidad a introducir una aguja en su interior va a ser difícil que obtengamos células en cantidad adecuada. El tejido óseo al ser efectado por un tejido neoplásico produce lesiones líticas que pueden ser fácilmente aspiradas y brinda mayor celularidad lo que nos permite una muestra adecuada para estudio.

(Fig. 3.- Lesión típica de osteosarcoma)

(Fig. 4.- Células fusiformes aspiradas de una lesión compatible con osteosarcoma. Se observan multinucleación, anisocariosis, anisocitosis con macrocitosis, varios nucleólos de formas irregulares y vacuolaciones finas)

Al introducir la aguja en la lesión, lo primero que nos va a llamar la atención es la suavidad de la masa, lo que nos haría pensar incluso que nos encontramos frente a una estructura semiquística. Con la aguja podemos recorrer muchas partes del tumor y realizar varios aspirados. Casi siempre la muestra suele ser hemorrágica pues existe mucha inflamación peritumoral. Se puede usar la técnica de punción con aguja sola o la técnica de aspirado. Si al realizar la punción con aguja sola la campanilla se satura de sangre muy rápido se recomienda cambar a la técnica de aspirado con jeringa. Si es posible, realizar la tinción inmediatamente para poder confirmar la presencia de células de tejido. Si esto no es posible se recomienda realizar por lo menos 05 extendidos de 05 punciones en 05 partes diferentes del tumor para tratar de asegurar una buena cantidad de muestra útil.

(Fig. 5.- Mitosis anómalas en un osteosarcoma canino)

Una vez en el microscopio, usando un aumento menor (4x) debemos realizar una búsqueda ordenada de grupos o zonas donde se aprecie una buena cantidad de células. Si la muestra se presenta hemorrágica es recomendable realizar una búsqueda más minuciosa en la periferia de la lámina pues las células de mayor tamaño suelen ser enviadas a ésta zona al momento de realizar el extendido por el sistema de squash o frotis. Si no se observan células de tejido a poco aumento se debe buscar en las otras láminas.

(Fig. 6.- Grupo de células de tejido obtenido mediante PAF de una masa compatible con osteosarcoma canino. Se recomienda evaluar la muestra con mayor aumento)

Los aspirados de osteosarcoma son altamente celulares, pueden presentar grupos o células individuales. En oportunidades es posible ver las primeras caraterísticas del tejido a poco aumento como es la presencia de una mátrix rosácea de material osteoide alrededor de los grupos celulares. Cuando tenemos la oportunidad de ver esta característica, podemos empezar a reforzar nuestra sospecha respecto al origen del tumor. Una revisión mas profunda o a mayor aumento nos revela un tejido está formado en su mayoría por células fusocelulares o mesenquimales bien diferenciadas en los tumores menos agresivos o pobremente diferenciadas en los ejemplares más malignos. Son características comunes de los osteoblastos neoplásicos pequeñas vacuolaciones citoplasmáticas, variación en tamaños de células, variación en tamaño de núcleos, mitosis anómalas, relación núcleo/citoplasma elevada, presencia de un nucleolo irregular (o varios), algunas células pueden presentar borde citoplasmático no definido. El citoplasma casi siempre se muestra basofílico o rosáceo en las tinciones con Diff Quick o azulado en las tinciones de Wright. Se pueden observar granulaciones citoplasmáticas en algunas células aunque este hallazgo no presente hasta la fecha un significado útil, los grupos celulares pueden estar acompañados de osteoclastos y osteoblastos benignos.

(Fig. 7.- Osteblastos neoplásicos con anisocitosis, aniscariosis, multinucleolo y relación núcleo citoplasma alta)
Se recomienda realizar un diagnóstico acompañado de radiografías de la lesión y un estudio histopatológico. Cuando no exista concordancia entre los resultados de el estudio citológico con los resultados del estudio histopatológico la recomendación diagnóstica del autor es guiarse por el resultado de la prueba citológica. El diagnóstico simplemente radiográfico es posible y es materia de los radiólogos y traumatólogos veterinarios.

LEPRA FELÍNA CON REACCIÓN MASTOCÍTICA O HIPERSENSIBLE

2011-02-09T10:50:00.000-08:00

En la práctica de animales menores de muchos países es conocida la infección por micobacterias (Mycobacterium). En la ciudad de Lima es una entidad poco frecuente y los veterinarios aún desconocen la existencia de la enfermedad. Las micobacterias pueden causar enfermedad en humanos y animales a través del contagio por contacto directo, ambiental y en le caso de algunos animales que no incluye al humano, por ingestión de carne o alimentos contaminados. La lepra felina y las micobacterias atípicas son los principales microrganismos de este grupo que afectan a nuestros pacientes produciendo lesiones de piel y en pacientes inmunosuprimidos enfermedad sistémica.

(Fig. 1. Lesión alopécica en la base de la oreja del paciente)

(Fig. 2. Misma lesión en la base de la oreja a mayor aumento)

Todos los microrganismos micobacterianos se encuentran en el grupo de las bacterias alcohol – ácido resistentes porque contienen una membrana celular rica en lípidos que inhibe el sistema de defensa del huésped e imparte una propiedad de tinción por la cual no puede ser teñida a través de tinciones convencionales. Sólo la tinción de Ziehl Neelsen puede mostrarnos al microrganismo teñido, las otras tinciones nos mostrarán filamentos o bastoncillos transparentes (imágenes fantasmales) en el interior de los macrófagos y otras células inflamatorias.

(Fig. 3. Mycobacterium sp. teñido con Ziehl Neelsen. X45)

La lepra felina es una enfermedad reconocida desde 1960 y se identificaba en gatos costeros o que habitan en puertos. La enfermedad aparece en gatos entre los 02 y 05 años de edad. Si bien se ha reconocido al Mycobaterium lepraemurium como el agente más importante, no es el único y existen reportes de Mycobacterium leprae, M. fortuitum, M. chelonae, M. flei, M. smegmatis, M. tuberculosis. Se sospecha que la vía de infección es a través de la rata que al parecer es un hospedero definitivo de la enfermedad. La forma de infección aún no se ha definido. Se sospecha que puede ser por mordidas, vectores o aerosol de secreciones nasales contaminadas.
Las lesiones de la lepra felina son siempre cutáneas. Puede formarse un granuloma o varios que pueden ser intradérmicos o subcutáneos, en forma de placas o nodulares y pueden ulcerase. Las lesiones se hallan con más frecuencia en la cabeza, cuello y miembros.
La toma de muestra para citología se puede hacer mediante PAF de la lesión y en casos de lesiones ulceradas se puede realizar un raspado y PAF combinados. La misma lámina puede ser usada para la tinción de Ziehl Neelsen. El cultivo es dificultoso porque no crecen en agar sangre y puede tardar hasta tres semanas cuando es exitoso.

(Fig. 4. Citológico de la lesión vista a poco aumento. PAF. Se muestra hipercelularidad. 4X)

(Fig.5. Reacción inflamatoria granulomatosa con presencia de hasta 08 mastocitos muy granulados. 45X)

DESCRIPCIÓN DEL CASO
Se remitió una muestra proveniente de un felino, tipo oriental, macho entero de 02 años con hábitos de vagabundeo. La muestra fue tomada mediante PAF de una masa en la base de la oreja con los siguientes resultados.
La muestra con poco aumento (4X) se muestra con hipercelularidad donde se aprecian algunos grupos desordenados de células con apariencia de macrófagos de tipo epitelioide, eritrocitos, cromatinas rotas probablemente proveniente de polimorfos nucleares neutrófilos degenerados. Al profundizar el con el objetivo de 10X y 45X comienzan a aparecer abundantes mastocitos maduros, activos, con granulaciones azuladas y rosáceas, macrófagos epitelioides, fibroblastos, células gigantes, polimorfos neutrófilos moderadamente degenerados y en cantidad no muy alta. Acompañan a la reacción linfocitos reactivos y eosinófilos en cantidad baja. Se observan filamentos no teñidos en el interior de los macrófagos y células gigantes compatibles con bacterias alcohol acido resistentes. Se realiza tinción de Ziehl Neelsen con hallazgo positivo de filamentos y bastoncillos muy acidófilos (rojizos) que confirman la presencia de bacterias acido resistentes.

(Fig. 6. Muestra conformada en un 80% por mastocitos maduros bien granulados. 45X)

Se recomienda cultivo y una correcta data respecto al estado de salud de los propietarios además de indagar sobre la política zoosanitaria respecto al hallazgo de la enfermedad en el País. (*)

DISCUSIÓN
En todas las bibliografías hay un acuerdo en que las reacciones inflamatorias que se observan a través del estudio citológico incluyen polimorfos, macrófagos, células gigantes, células gigantes multinucleadas y fibroblastos. La presencia de un número alto (muy alto) de mastocitos en la muestra puede desprender la posibilidad de la existencia de lesiones cutáneas diagnosticadas como mastocitoma felino en pacientes con lepra felina como en el caso que se detalla en este reporte.

(Fig. 7. Células gigantes con abundantes filamentos transparentes en la superficie compatibles con bacterias alcohol -ácido resistentes. 100X)

(Fig. 8. Células gigantes con filamentos fantasmales transparentes compatibles con Mycobaterium sp. 100X)

Citología Vaginal: La Herramienta Poderosa

2010-05-21T09:59:00.000-07:00

El estudio del ciclo estral mediante el hisopado vaginal es un procedimiento antiguo pero aún imbatible por costo, practicidad, tiempo y utilidad. De igual forma el hisopado vaginal nos da muchos más alcances respecto al estado del tracto reproductivo pues puede determinar infecciones, inflamación y neoplasia. Se sabe que un estudio vaginal bien realizado no es menos fiable que un dosaje de progesterona. Estoy seguro que muchos tienen preferencias por determinadas pruebas pero desde nuestra columna deseamos que todos los veterinarios de animales menores puedan realizar un examen citológico del ciclo estral sin complicaciones en su propia clínica o consultorio.

Fig.1.1 Secuencia del correcto hisopado de la vagina en las perras. Nótese que el hisopo contacta la pared caudal dorsal de la vagina.

TÉCNICA

Se introduce un hisopo limpio y si es posible estéril en la vagina de la perra asegurándose no tocar la vagina ventral, más bien debe ser orientado hacia la vagina dorsal o caudal. Sobar la zona, retirar el hisopo y rodarlo sobre una lámina portaobjeto nueva y limpia. La técnica de tinción es la misma que para cualquier otra muestra citológica. Algunos prefieren humedecer el hisopo con solución salina para favorecer la adherencia celular y hacer el proceso menos incómodo para el paciente. En mi experiencia cualquier tinción es buena para el estudio, desde las tinciones hematológicas (Diff Quick, Wright), azul de toluidina, azul de metileno, papanicolau, Shorr, H y E, hasta la tinta China.

Fig.2 Tipos celulares epiteliales a reconocer durante un hisopado vaginal. Mnemotecnia PISA

TIPOS CELULARES EPITELIALES

No debemos olvidar que para evaluar el ciclo estral debemos evaluar exclusivamente células epiteliales. La presencia de eritrocitos y células inflamatorias son igualmente una gran ayuda. Las células epiteliales a evaluar son:

Células Basales

Células Parabasales

Células Intermedias

Células Superficiales

Células Basales

Las células Basales son las precursoras de las células parabasales características del periodo de Anestro. Muy rara vez pueden observarse en un estudio citológico. Se aprecian como células casi redondas, pequeñas, uniformes con poco citoplasma basofílico.

Células Parabasales

Las células parabasales son las células más pequeñas que se encuentran de manera rutinaria en un hisopado vaginal. Son de forma redondeada con un núcleo grande y una relación núcleo:citoplasma alta. Son células de tamaño uniforme que se observan en los periodos de proestro temprano, diestro y anestro. Se obtienen muchas sábanas de células en perras que no han llegado a la pubertad, no confundirlas con células neoplásicas.

Células Intermedias

Son células parabasales intermedias con un tamaño mayor (muchas veces el doble) al de las células parabasales. Presentan un aumento en el tamaño del citoplasma más no del núcleo por lo que la relación núcleo:citoplasma baja. El citoplasma puede tornarse de un azul grisáceo pálido con ligeras irregularidades por la keratinización temprana. Éste proceso se hace más evidente a medida que pasa el tiempo y se acerca el periodo estral. También se les conoce como células transicionales o superficiales intermedias.

Células superficiales

Son células grandes con un núcleo pequeño que se ha reducido de tamaño y a medida que siguen madurando lo pierden por completo. El citoplasma es amplio con muchas irregulairdades y dobleces. En su estado más maduro presentan ausencia total de núcleo y es el estadío mas tardío de las células epiteliales vaginales.

Estadíos Citológicos del Ciclo reproductivo de las Perras

Proestro

Estro

Diestro

Anestro

Fig. 3 Imagen citológica de proestro. Células epiteliales parabasales e intermedias en presencia de eritrocitos y algunos neutrófilos. Las células epiteliales comienzan a formar ángulos a medida que comienza la queratinización.

Proestro

El proestro esta relacionado con un aumento del nivel de estradiol en sangre y la maduración folicular. El epitelio vaginal prolifera y se produce un escape de eritrocitos por diapedesis a través de los capilares tisulares. Todos estos cambios originan una imagen citológica característica del proestro. Los principales componentes celulares son las células parabasales y células intermedias con escasas células superficiales. La presencia de eritrocitos nos brinda una referencia vaga, no es un requisito. El fondo donde descansan las células es de un azul tenue por exceso de mucus. Se observan neutrófilos en cantidad moderada. A medida que va madurando el proestro van disminuyendo los eritrocitos y los neutrófilos con el consiguiente aumento de las células superficiales. Dependiendo del porcentaje de células superficiales podemos segmentar el proestro en proestro temprano, proestro intermedio y proestro tardío. En los pacientes felinos, específicamente en el gato, la única diferencia es la ausencia de eritrocitos y neutrófilos, las bacterias pueden estar presentes.

Fig. 4 Imagen característica de estro. Las células epiteliales superficiales no presentan núcleo, hay presencia de bacterias y algunas células con núcleo picnótico.

Estro

Más del 90% de las células que se exfolian durante el estro son células superficiales y en algunas perras puede llegar al 100%. Los neutrófilos se muestran ausentes (su presencia indica inflamación) y la presencia de eritrocitos es nula con frecuencia aunque se pueden presentar estros con eritrocitos en cantidad moderada. Como se mencionó, las células superficiales son grandes, con núcleo picnótico muy pequeño y en algunos casos ausente en el 100% de las células. El momento de máxima cornificación células es variable. Puede suceder entre el día 06 antes del pico de LH o 03 días después del pico de LH. El estro es el periodo de ovulación y suele ocurrir en los días 1 al 3 después del pico de LH. Se suele encontrar gran número de bacterias sobre las superficies de las células. El en promedio dura 09 días aunque hay reportes de 03 hasta 21 días. Cuando encontramos cambios citológicos compatibles con estro en la perra podemos asumir que es un buen momento para realizar la cruza con el macho. Los felinos poseen un porcentaje menor de células superficiales durante el estro (40%-80%) con un porcentaje de hasta 40% de células superficiales totalmente anucleadas, los eritrocitos son ausentes.

Fig. 5 Diestro. Células epiteliales parabasales e intermedias. Las células presentan bordes más redondeados, núcleo visible, presencia de eritrocitos y células epitelilales con neutrófilos en su interior (células metestrales).

Diestro

Comienza cuando nos percatamos que el número de células superficiales comienza a descender y las células parabasales e intermedias suben hasta un 50% de representatividad. Las células superficiales descienden en más de 20%. Los neutrofilos suelen reaparecer luego de varios días de ausencia, igualmente puede aparecer eritrocitos. El diestro aparece en promedio a los 08 días luego del pico de LH. Es muy difícil diferenciar un PROESTRO de un DIESTRO citológicamente. Se necesitan varias muestras y mucha información respecto del paciente, tamaño de la vulva y percepción macroscópica. Los felinos presentan un diestro con ausencia de eritrocitos, neutrófilos ausentes o en cantidad baja. Los cambios en las células epiteliales son similares en perras y gatas.

Anestro

La imagen citológica del anestro esta conformada por abundantes células parabasales e intermedias. Se pueden observar neutrófilos y bacterias. En la gata los neutrófilos están ausentes, el resto de cambios son similares.

COLOR, OLOR, CLARIDAD Y VOLUMEN: EXAMEN MACROSCÓPICO DE ORINA

2010-03-10T06:46:00.000-08:00

Los Veterinarios que se dedican a la práctica privada suelen escuchar a los propietarios de perros y gatos manifestar sus impresiones o propias ideas respecto a las características de la orina en su mascota. Es común escuchar: "mi perro está mal del hígado porque su orina está cargada.." o tal vez "mi perro está mal de los riñones porque orina con sangre". Todas estas apreciaciones son concebidas del boca a boca entre los propietarios de mascotas, traspolaciones de conceptos de medicina humana o simplemente porque repiten a medias la información brindada por su Veterinario de confianza. Pero que tan real es todo esto? que tan valioso es el examen macroscópico de la orina? Si bien podemos obtener información valiosa proveniente de "cómo se ve la orina", esta sólo es una pequeña parte de un total de pruebas que se deben realizar.

Ha medida que visito cursos y profesionales entendidos en el tema, puedo extraer la idea que no se da demasiada importancia al color, olor, claridad y volumen de la orina o que su importancia es mínima. La información vertida en éste artículo podría terminar confirmando ésto o tal vez devolverle la importancia que alguna vez tuvo el análisis macroscópico urinario.

VOLUMEN URINARIO

El estudio del volumen de orina nos brinda información para evaluar:

la existencia o grado de poliuria y oliguria

la cuantificación de sustancias excretadas en la orina(proteínas, aminoácidos, hormonas y minerales)

perfusión renal en pacientes en shock

deficiencia o exceso de fluidos en pacientes con fluidoterapia parenteral

La única forma de obtener un resultado confiable respecto al volumen de orina es mediante el confinamiento en una caja metabólica. Calcular cuanto orina en 24 horas usando el "chorro medio" o la bolsa colectora al momento de la consulta no es fiable pues la cantidad de orina dependerá de muchas variables. La cantidad de hormonas , electrolitos, minerales y metabolitos depende del promedio de concentración plasmática en 24 horas aunque no contenpla el ciclo circadiano y los cambios postprandiales. El volumen de orina puede ser estimado por la gravedad específica o densidad de la orina. Los pacientes caninos con densidades mayores a 1.030 (perros) o 1.035 (gatos) tienen pocas probabilidades de presentar poliuria. Una densidad urinaria como la mencionada nos indica que el agua está siendo reabsorbida por los glomérulos en exceso de solutos. Si la densidad es menor a la mencionada líneas arriba se podría pensar que el paciente está cursando poliuria fisiológica o patológica o lo que es peor oliguria patológica.

Las bolsas colectoras son una buena opción para medir el volumen en 24 horas

El volumen normal de orina determinado para un perro es de 20 ml a 40 ml de orina por kg de peso vivo en 24 horas (1 ml o 2 ml/kg/hora). Los gatos por otro lado producen un promedio de 28 ml de orina por kg en 24 horas. El volumen de orina para gatos menores de un año es de 5 ml hasta 60 ml por kg de peso vivo. Los cachorros tienen habilidades limitadas para concentrar y diluir orina en respuesta a cambios en el volumen extracelular. Lo cachorros y gatos pequeños tienen tendencia a la deshidratación debido a sus requerimientos altos de agua, la perdida insensible de fluidos y su habilidad alta de concentrar orina.

COLOR URINARIO

Los cambios de color en la orina suelen ser una de las principales causas por la cual los clientes acuden a las clínicas veterinarias. Lamentablemente, el cambio de color en la orina tiene un valor diagnóstico bajo. Probablemente, lo fácil que resulta y la ausencia de costo es el motivo por el cual se ve incluído en el urianálisis completo. El color de la orina debe ser evaluado con una buena fuente de luz de preferencia blanca o natural y es importante diferenciar la evaluación del color respecto a la evaluación de su transparencia. El color de la orina es el resultado de TODOS los componentes con color de la orina y se puede ver afectado por:

La cantidad de sustancias con color en la orina

el pH

La estructura bioquímica de las sustancias la cual puede cambiar in vitro y in vivo.

Algunos alcances importantes son que la mayoría de alimentos pierden sus pigmentos durante el proceso de digestión por lo cual no afectan el color de la orina. El color, la turbidez y el olor pueden cambiar in vitro a temperatura ambiente. No se debe sobredimensionar el significado de del color de la orina. Muchas enfermedades graves pueden producir orina con color normal (glucosuria) y colores inusuales no son siempre indicativos de enfermedad.

El color normal de la orina es amarillo suave, amarillo o ámbar. La intensidad del color amarillo va a depender de la concentración o dilución de la misma. El color amarillo es producido por la excreción renal del UROCROMO en plasma. El urocromo es un producto de la oxidación del urocromógen (sin color). La cantidad de urocromo en la orina determina su color y la cantidad puede verse incrementada en muestras in vitro expuestas a temperatura ambiente y exceso de luz. La fiebre y la anorexia pueden aumentar la cantidad de urocromo excretado.

Distintos grados de hematuria de un mismo paciente en 24 horas

Distintos colores de la orina y su definición

El hallazgo de un color anormal en la orina origina una serie de preguntas relacionadas a la dieta, administración de medicamentos y cambios ambientales. Un mismo cambio de color puede ser causado por muchas causas endógenas o pigmentos exógenos. A pesar que el cambio en la coloración indica una anormalidad, éste hallazgo es nada específico y poco útil para localizar la causa. Para determinar la causa se deben realizar exámenes de laboratorio y sedimento urinario.

"La mayoría de alimentos pierden sus pigmentos

durante el proceso de digestión

por lo cual no afectan el color

de la orina.."

La hematuria produce un color de orina que va desde el rojo hasta el negro pasando por varias tonalidades de rosados, marrones y pardos. La variedad en el color cuando hay hematuria está relacionada a la cantidad de sangre en la orina, el pH o acidéz y al intervalo de tiempo en el cual la sangre a estado en contacto con la orina. A medida que los eritrocitos se van desintegrando se produce una liberación de hemoglobina la cual al ser oxidada hacia metahemoglobina cambia su color hacia marrón o negro. La mioglobinuria igualmente causa una orina color marrón. La bilirrubina al ser degenerada produce un pigmento amarillo más oscuro de lo normal. Orina con un tono verde está relacionada a la degeneración de la bilirubina en biliverdina. Los cambios de color en la orina interfieren con los resultado de muchos tests colorimétricos.

CLARIDAD Y TRANSPARENCIA

El término "turbio" proviene del latin TURBIDUS que significa poco claro, irregular o nuboso que es la palabra más usada para describir la orina poco transparente. El grado de turbidez o nubosidad de la orina puede ser medido mediante un instrumento llamado Neflómetro. La orina normal es transparente. Si se observa turbia o nubosa debe ser examinada para determinar la causa y origen. La transparencia de la orina puede ser evaluada mediante la lectura de una hoja de periódico por detrás de un recipiente totalmente transparente con orina en su interior. El grado de turbidez puede ser expresado mediante términos como transparente, ligeramente turbio, moderadamente turbio o muy turbio.

Orina turbia o nubosa

Una muestra normal no presenta partículas visibles
Una muestra ligeramente turbia es caracterizada por precipitados ligeramente visibles que interrumpen la lectura del periódico en el fondo.
Una muestra moderadamente turbia puede oscurecer la lectura del periódico en el fondo del recipiente.
Una muestra muy turbia impide casi por completo la lectura del periódico en el fondo del recipiente

Como podemos rescatar de la metodología, la transparencia de la orina depende de los precipitados que contiene cuando es evaluada con luz. La causa de la turbidez puede ser contaminación de la muestra o una anormalidad subyacente. Los componentes del precipitado se identifican mejor luego de el exámen microscópico de la muestra previamente centrifugada.

La orina fresca normal siempre es transparente. En algunos casos se puede observar un anillo turbio en la superficie de la orina de gatos saludables debido a la lipiduria fisiológica. Se debe resaltar que la orina transparente o normal no siempre será orina saludable pues existen varias anormalidades que no producen cambios en la transparencia de la orina como son el exceso de glucosa, proteínas o cuerpos cetónicos. La orina transparente contiene igualmente cilindros y cristales en cantidad lo suficientemente baja para no alterar la transparencia de la misma.

La orina concentrada tiene más tendencia a mostrarse turbia que la orina diluida. Los cambios in vitro de la orina son causados por la luz, pH y la temperatura y no están relacionados con anormalidades in vivo. La formación de cristales in vitro relacionados a la temperatura ambiental son una causa común de turbidez y su solubilidad de igual forma esta relacionada a la misma temperatura. Si se observa formación de cristales se debe calentar la orina hasta 37°C para diluirlos. De igual forma el pH puede predisponer a la formación de cristales. Otras causas de turbidez puede ser la presencia de semen, heces o contaminantes del recipiente. Las causas más comunes de pérdida de transparencia o aumento de turbidez son:

Cristales
Eritrocitos, células inflamatorias y células epiteliales
Bacterias, levaduras y hongos
Gotas de grasa o lipidos

LA ORINA Y SU OLOR

La detección de un olor anormal en la orina rara vez representa una evidencia diagnóstica útil pero si percibe un olor diferente en la orina de un paciente se requerirá evaluación o urianálisis completo. Las muestras de orina conservadas de manera inapropiada suelen producir un olor muy penetrante y ésto puede ser un indicativo de una muestra deteriorada no apta para un urianálisis. La única forma de evaluar el olor de la orina es a travez de nuestro sentido del olfato. Los olores de la orina son clasificados como normal, amoniacal, putrefacto y desagradable. Un olor desagradable o anormal en la orina debe ser informado antes de realizar el urianálisis.

El olor de la orina puede ser un indicativo de problema

Las causas del olor anormal en la orina son determinadas luego de un urianálisis completo y muchas veces luego de un panel completo que incluye hemograma, perfil hepático y perfil renal. El olor normal de la orina varía de acuerdo a la especie y factores asociados. Un gato no castrado presenta un olor muy fuerte en la orina a diferencia de los gatos castrados o gatas. Los caballos tienen un olor aromático. Respecto a los olores anormales podemos comentar que en medicina humana, los pacientes pediátricos con olores anormales en la orina deben ser evaluados por problemas metabólicos. Algunos medicamentos como la ampicilina, infecciones bacterianas pueden producir olores anormales en la orina. El olor amoniacal de la orina es una anormalidad muy común. El amonio (NH3) es la causa del olor pues el amonium NH4 y la úrea no tienen olor. La causa común del cambio de olor de la orina puede ser el cambio de NH4 a NH3 debido a calor endógeno y exógeno que degrada la urea a NH3 o por las bacterias ureasas positivas que pueden ser patógenas o contaminantes. Por lo tanto, el olor amoniacal de la orina sugiere (pero no lo prueba) una infección con bacterias ureasa positivas. El olor putrefacto sugiere infección bacteriana en presencia de proteínas y es un olor obviamente anormal. La cetonuria produce segun algunos autores un olor dulce o frutal a la orina aunque siempre será más confiable el análisis correspondiente.
Algunas veces en la orina se podrá percibir el olor del recipiente que la contiene, olores a detergentes, o perfumes de los desinfectantes usados.

HEMATOLOGÍA TRADICIONAL Y MODERNA

2010-02-09T07:50:00.000-08:00

La hematología veterinaria se ha convertido en los últimos años en una ciencia que interesa cada día más a los médicos veterinarios en nuestro país. Esto se debe por una parte al interés de los profesionales por aprender, a la información actualizada que cada día se encuentra más al alcance del veterinario y a la importante labor de difusión que realizan los laboratorios fabricantes de equipos automatizados. La intención de este escrito no es brindar los últimos avances del campo, sino más bien brindar una revisión y opinión muy personal del manejo de la hematología animal. Por otra parte debo dejar en claro que no es mi especialidad la hematología, pero al igual que muchos de ustedes, la uso casi a diario para resolver casos clínicos, realizar prequirúrgicos, monitorear quimioterapias, entre otros.

"...en el conteo leucocitario la posibilidad de llegar y sobrepasar la máxima imprecisión permisible deja de ser una posibilidad y se convierte en una realidad."

Al igual que en todo el mundo, es el hemograma, el examen más solicitado por los veterinarios clínicos por las razones antes mencionadas. Considero importante que conozcamos las ventajas y limitaciones de cada procedimiento que nos lleva al resultado cuantitativo de las formas celulares que conforman lo que llamamos sangre.
Para realizar un hemograma con fines cuantitativos existen hoy en día dos grupos que son el análisis tradicional y los sistemas automatizados.
Se entiende por análisis tradicional a los métodos manuales que usan cámaras de conteo como la Neubauer y pipetas de dilución. En el otro lado, los métodos automatizados trabajan bajo tres sistemas: impedancia eléctrica, contadores centrífugos y contadores láser.

SISTEMAS AUTOMATIZADOS

Los estudios cuantitativos de los componentes celulares de la sangre comprenden el conteo de miles de células por cada muestra analizada. Es por esta razón que los sistemas automatizados suelen ser más precisos que los conteos manuales(1). Hasta hace algunos años, los veterinarios estábamos forzados a realizar estudios cuantitativos en equipos diseñados para medicina humana. Esto producía en muchas oportunidades resultados que creaban desconfianza en los clínicos veterinarios. Hoy en día gracias al acceso a la tecnología, podemos acceder a equipos automatizados diseñados especialmente para veterinaria con la consiguiente obtención de resultados más confiables.

1. CONTADORES POR IMPEDANCIA ELÉCTRICA

Descrito y usado por Coulter en 1956, el contador de impedancia eléctrica trabaja mediante la suspensión de las células sanguíneas en un líquido electrónicamente conductor(4). Cada partícula es forzada a atravesar un par de electrodos produciendo un cambio en la resistencia eléctrica entre los electrodos(1). Cada célula produce un pulso eléctrico específico que permite su clasificación y conteo.
Los equipos de medicina humana que trabajan por impedancia producen resultados cercanos a lo real cuando se analiza sangre canina. En el caso de los felinos la presencia de macroplaquetas suele producir falsas tromocitopenias al ser “confundidas” por eritrocitos.
En el caso de los leucocitos, los equipos de impedancia producirán un índice de variación menor al 5% pero los equipos para humanos deben ser calibrados eléctricamente para poder ser usado en conteo diferencial de leucocitos en medicina veterinaria(4).

FIG.1.- (GRAFICO DEL SISTEMA DE TRABAJO DE LOS ANALIZADORES HEMATOLÓGICOS DE IMPEDANCIA)

2. CONTADORES CELULARES CENTRÍFUGOS

También llamados analizadores “Buffy Coat” fueron introducidos en los 80’s como herramienta alternativa al conteo tradicional(1). El sistema está basado en la densidad variable de los componentes celulares al ser colocados en un capilar de micro hematocrito y ser sometidos a centrifugación. Un flotador cilíndrico específicamente colocado entre la capa de eritrocitos y el plasma expande en distintas capas de los componentes leucocitarios. Por último, la diferenciación se logra mediante el uso de reactivos y colorantes (naranja de acridina, oxalato potásico y un anticuerpo monoclonal) que cubren internamente el tubo o capilar)(1).
Los componentes una vez teñidos son expuestos a una fuente de luz azul violeta y la fluorescencia permite distinguir los componentes celulares. Los resultados contenidos comprenden hematocrito, hemoglobina, número de células rojas, número de leucocitos, granulocitos totales, neutrófilos, eosinófilos y porcentaje de reticulocitos(1).

FIG.2-(UNO DE LOS EQUIPOS CENTRÍFUGOS MÁS CONOCIDOS EN EL MEDIO - IDEXX)

Estos equipos son fáciles de usar y son los más accesibles para el uso en perro, gato, caballo y vacuno(1). Los resultados se obtienen en 7 minutos, aunque algunas veces especialmente en gatos, se requiere una segunda centrifugación de la muestra para producir una adecuada separación de las capas.(4) Muchos errores pueden ser detectados mediante los gráficos de Buffy Coat que proporciona el equipo. Otras anormalidades como son la microcitosis, hipocromasia o células inmaduras invalidan los resultados inmediatamente(4).

3. CONTADORES LASER O CITOMETRÍA DE FLUJO

El principio de trabajo de estos equipos radica en la dispersión de la luz sobre una célula. Las interrupciones del láser pueden ser usadas para el conteo celular, mientras que los cambios en la refracción de la luz brindan información de tamaño celular o complejidad y densidad interna. Es de esta forma que los equipos láser pueden determinar el recuento de eritrocitos, recuento de leucocitos, concentración de hemoglobina, distribución de los eritrocitos, distribución de la hemoglobina, dos histogramas, citograma eritrocitario, recuento de plaquetas, volumen plaquetar medio, el histograma plaquetario, identifica errores como la agregación plaquetar.(1)

Estos equipos pueden llegar a costar hasta $ 200.000.00, por lo que su uso está destinado a motivos educacionales y grandes corporaciones. Su uso en práctica de animales menores en Latinoamérica es muy bajo.

Ya sea cualquiera de los mencionados sistemas automatizados que estuviera usando, nunca deje de realizar un frotis manual simple para evaluar morfología celular y posibles anormalidades que podrían alterar los resultados. Si no cuenta con microscopio o sus conocimientos en hematología no son suficientes, remita la lámina a un patólogo clínico, patólogo, hematólogo o citólogo de confianza.

FIG.3-(EQUIPO LASER DE IDEXX)

SISTEMA MANUAL

El sistema manual o tradicional de conteo celular es conocido por todos los veterinarios. En este sistema se usan dilutores de leucocitos y de eritrocitos, cámara de Neubauer y un microscopio(3). Si bien este sistema se ha usado como referencia por muchos años en el campo veterinario, se debe señalar que posee demasiados puntos críticos que si no son abordados con la técnica adecuada nos puede brindar resultados lejanos (muy lejanos) a la realidad. El conteo de eritrocitos mediante cámara de Neubauer presenta menos probabilidad de error excesivo, por lo que los resultados de un buen examen son bastante aceptables para el manejo del paciente a diferencia del conteo leucocitario que presenta una posibilidad de error aleatorio que excede la cantidad máxima de errores aceptable(6). Es por esta razón que muchos autores comparten la idea que es imposible obtener resultados útiles para la medicina clínica.

Para poder explicar mejor los posibles errores en los conteos leucocitarios se puede usar una fórmula matemática de imprecisión analítica total (CVTOTAL) que está compuesta por varias fuentes importantes de error como son imprecisión del analizador (CVANALIZER), clasificación celular inconsistente (CVCLASS), error de muestra estadística (CVSAMPLING) y mala preparación de la muestra (CVPREP). Por lo tanto se presenta:

CVTOTAL = raiz cuadrada de :CV2ANALIZER + CV2CLASS + CV2SAMPLING + CV2PREP

El error de la muestra estadística es la magnitud o porcentaje de la cantidad real de células que hay en la muestra contra la cantidad de células contadas. Es conocido que a mayor cantidad de células contadas es menor la probabilidad de error, pero en el conteo leucocitario la posibilidad de llegar y sobrepasar la máxima imprecisión permisible deja de ser una posibilidad y se convierte en una realidad. Sólo los conteos de polimorfos neutrófilos pueden producir resultados que no sobrepasen el límite de errores permitidos siempre que se cuenten 500 células o más(6). Para los otros tipos celulares presentes en el paquete leucocitario, el conteo de incluso 500 células no presenta ninguna garantía.

FIG.4-(TABLA DE ERITROFORMAS O CAMBIOS MORFOLÓGICOS ERITROCITARIOS)

Luego de esta información considero necesario aclarar que no existe método 100% perfecto para los estudios hematológicos cuantitativos ya que los métodos automatizados también presentan otros escenarios de posibilidad de error, aunque notablemente menores(6). La tecnología para los estudios hematológicos esta logrando avances importantes y en donde se pueda usar hay que usarla dentro de las posibilidades de cada práctica profesional.

ESTUDIO DEL FROTIS SANGUÍNEO

El estudio del frotis sanguíneo es un procedimiento rutinario y fundamental para complementar los estudios cuantitativos de los componentes sanguíneos. Los cambios en la morfología de las células sanguíneas nos pueden brindar información sobre pérdidas masivas de sangre, exposición a toxinas, reacciones inmunomediadas e infecciosas(4).

El correcto estudio del frotis depende de varios factores entre los que destacamos la adecuada toma de muestra, correcto extendido en monocapa, secado inmediato, buen manejo de las tinciones hematológicas, microscopio binocular con objetivos 10, 40 y 100 (inmersión) en buen estado y personal entrenado para éste propósito.

ANORMALIDADES ERITROCITARIAS

1. FRAGMENTACIÓN

Son células que han perdido parte de su membrana celular con o sin pérdida de citoplasma. Las causas más comunes suelen ser turbulencias sanguíneas o excesiva precipitación de fibrina. La excesiva fuerza al realizar los frotis no produce fragmentaciones a diferencia de lo que comúnmente se cree. Entre las patologías que presentan fragmentación frecuente tenemos las estenosis cardiacas al producir turbulencia al interior de la cámara cardiaca, problemas esplénicos (hemangiosarcoma) debido al largo tiempo de tránsito de los eritrocitos a través de capilares con circuitos anómalos, filariasis cardiaca y coagulación intravascular diseminada.(2)

2. CAMBIOS OXIDATIVOS

Los cambios oxidativos ocasionan desnaturalización de la hemoglobina por toxinas endógenas o exógenas. Los eritrocitos con cambios oxidativos adoptan formas en “nariz de payaso” que se llaman cuerpos de Heinz. Usando tinciones hematológicas rutinarias (Diff Quick, Tinción 15, Hemacolor) se observan como una única proyección de la membrana citoplasmática con una zona pálida que la rodea(1). Los cuerpos de Heinz se tiñen de azul cuando se usa Nuevo Azul de Metileno como tinción permitiendo su reconocimiento inmediato. Entre las causas más comunes de cambios oxidativos en los eritrocitos tenemos la intoxicación por cebolla, acetominofen, paracetamol y naftalina(1). Entre las causas endógenas se observan la diabetes mellitus, linfomas, enfermedad renal crónica.
Los leucocitos presentan igualmente cambios tóxicos como son la multinucleación y degeneración nuclear.

FIG.5-(CUERPOS DE HEINZ TEÑIDOS CON NUEVO AZUL DE METILENO)

3. CUERPOS DE HOWELL – JOLLY

Los cuerpos de Howell – Jolly son remanentes nucleares en el citoplasma de los eritrocitos. Son basofílicos (azulados) y esféricos. Se pueden observar durante la producción excesiva de eritrocitos y luego de esplenectomías.

4. ANISOCITOSIS

Se refiere al hallazgo de eritrocitos de distintos tamaños en un mismo campo de observación. La anisocitosis leve puede ser hallada en perros y gatos saludables. En anemias regenerativas, autoinmunes, hemolíticas, por cuerpos de Heinz y variación racial.

5. MICROCITOSIS Y MACROCITOSIS

La microcitosis es el hallazgo de eritrocitos más pequeños de lo normal (7micras) y la macrocitosis es el hallazgo de lo opuesto, células más grandes.

Existen muchos más conceptos y clasificaciones de anormalidades encontradas en el hemograma que podemos discutir. Por favor, estaré muy complacido en contestar sus consultas y cuestionamientos. Muchas gracias….

La enfermedad del Perro Peruano

2010-01-13T10:20:00.000-08:00

El perro sin pelo del Perú es un simpático animal de compañía, extrovertido y obediente. La temperatura de su cuerpo tiene tres grados más que la de los seres humanos, debido a que su falta de pelo lo obliga a elevar su temperatura corporal para compensar la pérdida de calor a través de la piel desnuda. Ha sido reconocido oficialmente como patrimonio nacional del Perú, aunque ha existido desde el actual Ecuador hasta la Argentina. Es el único perro nativo del Perú.
La Federación Cinológica Internacional (FCI), con sede en Thuin, Bélgica, reconoce y registra el 12 de junio de 1985 al perro sin pelo del Perú en su nomenclatura de razas con el número 310, clasificándolo en el Grupo V, tipo Spitz, que es para aquellos perros atléticos y ágiles ideales para carreras y en la sección 6 en la que se ubican los perros tipo Primitivos.
Al calificársele de perro primitivo, se le reconoce como de raza pura, es decir, la naturaleza los hizo tal como son, no habiendo variado sus características morfológicas en miles de años, tal como puede apreciarse en diferentes huacos preincas.

Fig. 1.- Amauta Pedro Weiss Harvey. Padre de la Patología peruana y estudioso del perro peruano

El amauta Pedro Weiss publicó en el novecientos un interesante trabajo sobre su historia y sus características. "No es una raza en el sentido zoológico pero si una variedad teratológica, decía. La falta de pelo es uno de los síntomas de un síndrome de hipoplasia ectodérmica familiar. El síndrome comprende piel, dientes y en algunos casos las uñas, trasmitiéndose como factor dominante. En algunos puede existir algún acoplamiento del síndrome con el sexo masculino. Es más fácil conseguir machos que hembras."

A medida que el Perro Peruano se fue tranformando en una mascota popular se empezó a tener más cuidado con su salud y apariencia. Es ahí que los veterinarios nos comenzamos a percatar que la mayoría de las consultas de éstos caninos eran de piel y estaban relacionadas a unos "tumores" o "bolitas" que le salían, se ulceraban y muchas veces se infectaban. Pero hablemos de en términos dermatológicos y patológicos que es lo que nos compete.

El Perro peruano sin pelo, como bien lo mencionó Weiss, padece de hipoplasia ectodérmica y además es un caso "aceptado" de Hipotricosis Congénita. La hipotricosis congénita es la carencia de pelo y glándulas anexas en zonas de la piel en las cuales deberían estar presentes. La razas alopécicas como el Perro Peruano, el Perro Mexicano y el Chino Crestado, son todas el resultado de una mutación genética espontánea que ha sobrvivido gracias a la crianza y cruzas de ejemplares recesivos y dominantes. En la mayoría de casos la características fenotípicas se muestran al momento del nacimiento y otras veces en el muy corto plazo.

Fig. 2.- Foliculitis con infiltración de polimorfos neutrófilos

En la hipotricosis congénita, la ausencia de pelo puede ser la única anormalidad pero puede estar acompañada con otros defectos de origen ectodermal como son dentición anormal o producción anormal de lágrimas. La ausencia de pelo puede ser parcial o total, los pelos sensoriales faciales pueden mostrarse retorcidos o ausentes. La mayoría de ejemplares sufre una pigmentación a medida que van madurando, en algunos otros casos la pigmentación es pobre y éstos ejemplares padecen dermatitis actínicas e incluso carcinomas. LAS FOLICULITIS BACTERIANAS Y COMEDONES son comunes y se vuelven más extensivas a medida que avanza la edad.

Fig. 3. - Comedón y reacción inflamatoria perifolicular

Estudio Histopatológico de la Hipotricosis Congénita

El lugar para toma de biopsia puede ser cualquier área con alopecia completa. Se debería tomar otra muestra de la zona con mayor cantidad de pelo posible para realizar una comparativa de piel semi normal con piel alopécica. De igual forma hacer un comparativo de tamaños de folículos y su densidad.

La epidermis y la dermis del perro peruano es casi normal aunque se evidencia una dismunución en la densidad de los foliculos por unidad de área de dermis. Los folículos pilosos secundarios se encuentran igualmente disminuidos. Los cabellos que se pueden encontrar en los folículos pilosos normalmente se encuentran en la fase telógena pero no pierden su forma ni se observan toruosos. La keratosis folicular puede estar presente y puede ser severa formando comedones que pueden alcanzar gran tamaño y inflamarse y contaminarse. Los hallazgos de foliculitis son muy comunes, igualmente la pioderma y dermatitis hiperplásica crónica. Puede observarse una disminución en el tamaño de las glándulas sebáceas pero su número en cantidad puede ser normal. La ausencia total de folículos y glándulas anexas se han reportado en algunos casos y esta relacionada con un mayor defecto ectodermal. Se debe diferenciar las razas alopécicas con la alopecía adquirida o displasia folicular.

Fig. 4.- La pigmentación aumenta con la edad

Comedones y foliculitis

Los comedones son la acumulación de keratina en el folículo piloso. En el caso del perro sin pelo del Perú la acumulación puede ser tan grande que suele producir foliculitis, romper el folículo y extravasar al intersticio dermal produciendo una reacción a cuerpo extraño. El material inflamatorio que esta caracterizado por polimorfos nucleares neutrófilos se acumula y se abre paso hasta encontrar una salida al exterior (forúnculo). Esta patología no la padecen todos los ejemplares pero es la más común y su control se basa en controlar la producción o acumulación de keratina y favorecer su drenaje hacia el exterior. Éste problema no tiene cura pero varios protocolos terapéuticos que podemos discutir.

Es muy importante conocer de enfermedades cutáneas y considero que es aún más importante conocer las de nuestro cánido de bandera. Espero sus comentarios y muchas gracias.

Guía para comprar un Microscopio útil

2009-12-04T06:37:00.000-08:00

(Microscopio de uso forense con poca utilidad en la práctica diaria de animales menores)

Muchas veces y en muchas oportunidades cuando me he encontrado con colegas me comentan que están decididos a comprar un microscopio y las preguntas son siempre las mismas, cuanto debo pagar por un microscopio y que marca recomiendo. Siempre contesto la pregunta con otra, que deseas hacer con tu microscopio? Deseas diagnosticar ácaros o deseas más poder, más luz y calidad de imagen? deseas compartir imágenes a través de la web y realizar telemedicina?. Bueno, a continuación trataré de contestar algunas de las preguntas formuladas pero antes me parece imprescindible que conozcan lo que es un microscopio compuesto y sus partes.

Los oculares: pueden ser uno(monoculares) o dos(binoculares). Los oculares son donde posamos los ojos. Los lentes más cerca del observador y su función es ampliar la imagen de los objetivos. Muchos son ajustables para mejor comodidad del observador. Los oculares son lentes que no son críticos para determianr la calidad del microscopio ya que su desgaste es lento y su reposición es económica. Algunos oculares vienen con puntero para fines educativos y otros con regla para poder medir la estructuras evaluadas.

Los objetivos: son los lentes que están más cerca de la muestra. Su calidad es CRÍTICA para la elección de un microscopio. Un microscopio con malos oculares no sirve, es como un ecógrafo con transductores malogrados. Existen en medidas de 4x, 10x, 40x, 45x y 100x(inmersión) y de acuerdo a la amplitud de imagen útil existen los convencionales (muy parecido a los televisores de pantalla vidrio redonda en los cuales la calidad de imagen de las zonas laterales no es buena) que son la mayoria, los semiplancromáticos que tienen una calidad de imagen central más amplia (ideal para citologia, histologia y hematologia) y los plancromáticos que son los objetivos tipo pantalla plana en los cuales uno obtiene la misma calidad de imagen en las zonas laterales como en el centro. Éstos últimos son material de lujo, tal vez no necesarios para la práctica de animales menores. Casi todos los objetivos son intercambiables entre marcas con algunas excepciones como Nikon que usa su propio sistema. En casi todas las marcas de microscopios los objetivos de 4x y 10x suelen ser de calidad aceptable, es en los aumentos de 45x y 100x que se nota la calidad de un objetivo.

(Partes de un microscopio compuesto tradicional)

Condensador: es el lente que concentra la luz sobre la lámina o muestra. Necesita buena fuente luz para que trabaje adecuadamente.

El diafragma: Regula la cantidad de luz que entra al condensador. Es muy útil para buscar cristales en orina, gotas de colesterol o para gente que es muy sensible a la luz. Su calidad no es determinante en la elección de un microscopio y sin una buena (muy buena) fuente de luz, su utilidad es casi nula.

Foco: fuente de luz que dirige los rayos hacia el condensador. Es otro factor que considero CRITICO en la elección de un microscopio. Debe ser una luz blanca potente, con el difragma totalmente abierto debe cegarnos en muestras poco celulares. Sin un buen foco no podremos trabajar adecuadamente con objetivos de 45x y menos 100x.

Soporte: es la base o "frame" del microscopio, sobre él se arma el equipo y existen varias formas de soporte pero casi todas bastante ergonómicas. Mientras más complejo es el equipo, mas abultado es el soporte aunque hoy en en día se obtiene muy buen equipo y bastante compacto.

Platina: lugar donde se coloca la lámina o muestra. Existen las más rudimentarias en las cuáles arrastras la lámina con la mano, las mecánicas que son lo suficiente útiles para veterinaria y las electrónicas que se manejan con botones.

Cabezal: contiene los sistemas de los oculares y pueden ser monoculares, binoculares, trinoculares, de dos cabezales binoculares para fines educativos o de cinco para enseñanza especializada. Si uno va a usar su microscopio por tiempo corto, 02 o tres veces a la semana se recomienda un microscopio con cabezal monocular, si uno pasa mucho tiempo con los ojos en el microscopio se recomienda un binocular con gomas para apoyar el arco superciliar y no cansarse mucho.

Revólver: es donde se alojan los objetivos. Pueden tener espacio para tres, cuatro, cinco y hasta seis objetivos.

Macrométrico: tornillo de enfoque para acercamiento y alejamiento rápido. Se usa para los aumentos de 4x y 10x.

Micrométrico: tornillo de enfoque para acercamiento y alejamiento más sutil. Se usa para aumentos de 45x y 100x. Suele desajustarse con el paso del tiempo y alejarnos la imagen sin nosotros desearlo. Puede requerir servico técnico.

(Microscopio LeicaDM3000 específicamente diseñado para citología y hematología. Equipo totalmente digital. Nótese los botones programables para los objetivos)

Bien, ahora que ya saben como se llama cada parte y para que sirve pueden tomar una mejor decisión. Pero, cuanto cuesta un microscopio??Bueno, tomen asiento, un buen microscopio cuesta una buena cantidad de dólares. Por favor no esperen encontrar un buen microscopio usado por menos de $1000 a menos que se los venda una persona de absoluta confianza. Un microscopio nuevo de marcas como Leica, Nikon, Olympus u otras que nos pueda servir en patología clínica no cuesta menos de $5000 (cincomil dólares americanos) en un concesionario autorizado, incluso tuve la oportunidad de ver hace algunos años microscopios Leica bastante standard en $8000 (ochomil dólares americanos). Los microscopios de marca vienen con una garantía casi de por vida aunque algunos de sus componentes no sean A1. Por ejemplo, la mayoria de éstos equipos vienen con objetivos simples, no semiplancromáticos y menos plancromáticos. Si ustedes quieren un microscopio con estas bellezas les va a costar unos mil dólares extras como mínimo en el caso de de los semiplan y bastante más en el caso de los plancromáticos. Osea, como se dice en Perú, nica. Éstos precios son para universidades y colegios que son los que compran éstos equipos cada cierto tiempo, no para el común de los veterinarios mortales como nosotros.

(LABOMED CxL. Muy buena opción económica. Buena fuente de Luz y objetivos semiplancromáticos)

Ahora, si alguien tiene un dinerito que cayó del cielo puedo recomendarles un microscopio perfecto para la patología clínica y citología, LEICA DM3000 con revolver eléctrico digital para cambiar de objetivos sin despegar los ojos, con condensador y regulador digital de luz, además con opción de manejo con pedal. Todo automatizado, muy buen equipo y muy caro. Precio aprox $5000 (cincomil dólares americanos).

Para los que no pueden pagar mucho, existe una marca que a mi criterio es excelente y extrañamente su precio es bajo. LABOMED ofrece microscopios con objetivos semiplancromáticos, buena fuente de luz y de calidad muy buena que encaja con las necesidades de los que nos dedicamos a patología y patología clínica. Un buen equipo de ésta marca parece ser(porque no lo he probado) el LABOMED CxL. Para los interesados, he visto una empresa aparentemente seria que los ofrece en mercadolibre.com, asi que nada pierden con probar.

(Equipo de microscopia para estudio en grupo, buena opcion para universidades y estudios de postgrado)

Para los chicos que recien empiezan, que tan sólo quieren observar ácaros y tal vez diferenciar procesos inflamatorios de neoplasicos entre otras pruebas que no exigen demasiado de los equipos, recomiendo un microscopio simple de segunda, monocular de preferencia pero que tenga buena fuente de luz. Existen microscopios de la India y Koreanos de precio accesible y no tan malos. Éstos normalmente se pueden encontrar en la avenida Emancipación en el centro de Lima. Otro tema respecto a los microscopios y equipos médicos en general es la procedencia, aún en la mente de muchos la procedencia Alemana es garantía de calidad, NADA MÁS FALSO. He tenido la oportunidad de probar microscopios de supuesta procedencia alemana y no son más que pésimos equipos asi que no se dejen llevar por la procedencia simplemente.

A manera de resumen hago las siguientes recomendaciones finales antes de comprar un microscopio. Lleven una lámina coloreada u otra sin colorear con muestra para probar el equipo que desean comprar, no dejen que el vendedor use su lámina para este propósito porque de éstos trucos éllos son los expertos. Usen todos los objetivos, se debe ver claro con todos y cuando usen el objetivo de 100x se debe ver claro con un fondo iluminado, no oscuro porque cuando tengan una muestra muy celular no podrán ver nada. No se dejen engañar por la cámara de video, si un microscopio viene con cámara no significa que sea de buena calidad, en el caso de los vendedores de Emancipación he visto que cuando un equipo no se vende le colocan una cámara de video para que se venda más rápido. Vean que el micrométrico no se regresa sólo y que la platina no esté gastada porque eso traba la lámina y no se desliza con facilidad. No usen el aceite de inmersión con el que vienen los equipos, mejor compren uno. Bueno, si hay algo que he dejado pasar por favor espero que me lo hagan saber. Un saludo a todos....

Cristales de Hematoidina, gemas de la hemorragia

2009-11-27T08:31:00.000-08:00

(Cristal de Hematoidina en su forma típica. Fondo con tinción de Diff Quick. Aumento x 100)

Estoy seguro que muchos de los que nos leen se han topado alguna vez con Cristales de Hematoidina en sus preparados citológicos. Igualmente sé que hay muchos que nos los conocen. Existen muchos veterinarios y de otras disciplinas que se han topado con estas gemas romboides de color del oro y no han podido determinar qué son ni su procedencia. Bueno, la literatura no habla mucho sobre éstos cristales y es por ésta razón que a continuación brindamos algunos datos al respecto e imágenes de cristales de Hematoidina.

El nombre de Hematoidina proviene del griego antiguo en el cual "haima" significa sangre y "eidos" significa resemblanza. Por lo tanto, Hematoidina significaría "resemblanza de sangre". El nombre está bien puesto porque los cristales de Hematoidina derivan de la sangre.

(Cristales de Hematoidina en el interior de una macrófago. Sialoceles canina. Fondo Tinción de Diff Quik. Aumento x 45)

(Cristales de Hematoidina.Cialoceles canina. Fondo Diff Quick. Aumento x 100)

La hematoidina es un pigmento marrón amarillento y algunas veces amarillento rojizo que se libera del hierro y está formado por hemoglobina. La hemoglobina es un sustancia presente en los eritrocitos y transporta el oxígeno hacia las células del cuerpo. La Hematoidina se forma a partir de la hemoglobina en zonas en las cuales hay una presión reducida o nula de oxígeno. La Hematoidina posee una coloración muy similar a la billirrubina pero es producida en otra localización. La hematoidina es formada en el interior de las células que comprenden el sistema reticuloendotelial, es decir, las células reticuloendoteliales como son los macrófagos.

(Cristales de Hematoidina. Carcinoma Mamario. Fondo tinción de Diff Quick. Aumento x45)

(Cristales de Hematoidina. Carcinoma mamario. Fondo Diff Quick. Aumento x45)

Los macrófagos fagocitan bacterias, cuerpos extraños y células para combatir las noxas. Los cristales de Hematoidina se forman en el interior de los macrófagos que han realizado eritrofagocitosis pero se pueden ver de igual forma cristales libres luego de 5 a 7 días de sangrado intersticial profuso.

Microscópicamente, su forma típica es de diamante de 04 ángulos color oro o ámbar pero pueden presentar formas estrelladas, rectangulares y triangulares.

En la experiencia de quién escribe he podido encontrar cristales de Hematoidina en lesiones mamarias(carcinomas), sialoceles (obstrucción de conducto salival con acumulación subcutánea), y hemangiomas cutáneos. Otros autores mencionan hallazgos en hisopados vaginales, y examen directo de heces. En general se pueden encontrar en cualquier tejido en el que ha ocurrido un sangrado y puede ser signo de trauma o hemorragia.

Respuesta Celular frente a Noxas

2009-10-23T11:19:00.000-07:00

Un constante cambio en el ambiente demanda una considerable adaptación celular. Muchas de estas adaptaciones se realizan a un nivel bioquímico y representan una fina regulación de la función metabólica. Sin embargo muchas de las adaptaciones son igualmente acompañadas por un cambio estructural de las células que son visibles microscópicamente. Muchos de estos cambios van desde un crecimiento del número de células siguiendo el patrón normal del tejido, como sucede en el crecimiento de la glándula tiroides durante la preñez debido a la acción del incremento de hormona estimulante de la tiroides en el epitelio tiroideo. Éste es un ejemplo de adaptación a un proceso fisiológico normal. Por otro lado, ciertos cambios que se alejan de los patrones normales pueden resultar en daño celular o promover una función celular anormal, estos estímulos con PATOLÓGICOS.

Si las células logran adaptarse a los cambios de forma exitosa podran seguir funcionando de manera normal o se adaptarán al cambio. Por otro lado, si las células no logran adaptarse al cambio pueden morir por apotosis (muerte celular programada - proceso fisiológico) o por necrosis. Otras células pueden responder de manera negativa al cambio y volverse neoplásicas.

El destino de una célula que es expuesta a una noxa depende por un lado de la magnitud del estímulo y por otro lado del qué tan suceptible es la célula al cambio. Por ejemplo, una neurona es mucho más susceptible a la hipoxia que un fibroblasto. Cuando las células son estimuladas negativamente se producen cambios relacionados al stress antes de producirse cambios estructurales. Estos cambios se manifiestan mediante la inhibición de muchos genes y la activación de otros genes productores de proteínas específicas para el stress con efectos cytoprotectivos. Esta respuesta no genera cambios morfológicos en las células pero las proteínas pueden ser detectadas usando la inmunoistoquímica.
El camino que sigue una célula luego de ser expuesta a una noxa o estímulo negativo depende si el daño se produce en sistemas subcelulares selectivos o en toda la célula. Aún no se conoce el motivo por el cual una célula decide tomar el camino de la apoptosis (muerte celular programada) en vez de la necrosis aunque el estudio del interior profundo de la célula ya comienza a dar algunas respuestas. Si el daño en las organellas de la célula es moderado, especialmente las que proporcionan la fuente de energía, se desarrollarán cambios morfológicos llamados degeneración celular. Los cambios estructurales más comunes son hipertrofia difusa, degeneración hidrópica, degenración grasa. Éstos cambios son reversibles siempre y cuando la noxa sea removida o derrotada. Bajo estas circunstancias las células pueden regresar a la normalidad mediante la autofagia de las organelas dañadas y la síntesis de nuevas proteínas. En algunos casos la recuperación es imposible y la célula dañada muere. Luego de la muerte se producen cambios morfologicos de necrosis.

El daño selectivo a organelas claves activan el proceso de apoptosis. Éste es un proceso altamente organizado que activa todo un sistema de destrucción de la célula. Los daños en el ADN, en la superficie de la membrana celular o mitocondrias son estímulos potentes para activar la apoptosis. De igual forma, las células que inician un proceso degenrativo pueden activar en algunos casos la muerte celular programada.

En otros casos, el estimulo negativo o noxa puede producir cambios estructurales en el ADN que no causan la muerte celular pero desencadenan una displasia e incluso una conducta celular aberrante con exesiva multiplicación e inhibición de la apoptosis que es llamada neoplasia.

MEMORIAS DEL LAVC 2009

2009-10-21T12:31:00.000-07:00

Hola a todos,

ya repuesto de cuatro días de intensas charlas en el Latin American Veterinary Conference (LAVC) me dirijo a ustedes para contarles a los que no pudieron estar presentes mis impresiones sobre ésta ultima conferencia que se realizó en Lima.

Comencemos por las instalaciones, el centro de Convenciones del Colegio Médico del Perú resultó ser una grata sorpresa. Las instalaciones son de primera, el auditorio muy confortable, moderno y acogedor a pesar de la tremenda capacidad para albergar visitantes. Contaba con una pantalla muy grande en la cual se podía apreciar con detalle las fotos, videos y diapositivas de los ponentes ya sea desde platea o mezanine. Muchos tuvimos problemas para poder disponer del los estacionamientos subterráneos. Pude acceder al parqueo y notar que el estacionamiento estaba lleno en un 10% de su capacidad por lo que era perfectamente factible llegar en auto y estacionarse sin causar congestión, a lo mejor es algo que se puede solucionar en los años venideros ya que muchos que llegaron en auto tuvieron que volver a casa y llegar en taxi.

El "check in" fue muy agil y rápido a diferencia de otros años, no hubo colas salvo para los que requieren traductor inalambrico. Los auditorios no se mostraron llenos, poca asitencia para la calidad de expositores que nos visitaron éste año. El grueso del público eran estudiantes de las distintas facultades de Veterinaria del país, en segundo lugar visitantes del extranjero con mucha representación de colegas Ecuatorianos, Chilenos, Brasileros entro otros. Me llamó mucho la atención la ausencia de muchos de los colegas nacionales de práctica privada, es algo que se debería reflexionar pues es muy probable que no tengamos la oportunidad de recibir visitantes de ésta calidad en un buen tiempo. A ellos les recuerdo que lo más importante en una práctica privada es la "excelencia profesional" y éso sólo se logra con la capacitación constante. Respecto a los expositores los menciono por individual y sin un orden en particular:

Dr. Peter Irkhe: Absolutamente magistral, en cada una de sus charlas mostró un conocimiento sólido del campo de la dermatología y una excelente capacidad para transmitir conocimientos, incluso a los que recién incursionan en éste campo. Puso nuevamente a flote la Dermatitis por Malassezia como causa importante de dermatitis en caninos, su charla de Alergias Alimentarias fue muy buena mostrando su relación con la atopía canina, excelentes imágenes de alergia alimentaria Felina y un dato importante fue la confusión de muchos casos de alergia felina con complejos granuloma-eosinofílico, asi que mucho ojo. La charla de Pioderma no desentonó y presentó nuevos protocolos terapéuticos hablando muy bien de las quinolonas para tratamientos como alternativa a las cefalosporinas. En las charlas resaltó la importancia de realizar estudios citológicos en los pacientes con dermatopatías con excepción en su charla de Dermatofitosis. El Dr. Irkhe fue muy honesto con la audiencia al resaltar que era la primera vez que realizaba un charla sobre dermatofitosis y que en Davis otro catedrático era el encargado de éste tema. Irkhe realizó ésta charla a pedido de él y no desentonó aunque la gran ausente en ésta charla fue el estudio citologico...que decepción!!! pero esta perdonado. Irkhe manifiesta que el motivo principal por el cual no realiza el estudio citológico en pacientes en los que sospecha de dermatofitosis es que prefiere usar la técnica del examen directo del pelo con KOH (Hidroxido de Potasio) aunque no dió explicaciones claras de la ventaja de ésta tecnica respecto al estudio citológico. Personalmente pude entrevistarme con él luego de la charla y me pidió si era posible que pudiera mandarle imágenes de hongos en estudios citológicos a lo cual accedí sin dudarlo. Espero que en futuras charlas en otras partes del mundo pueda incluir a la citología en los métodos diagnósticos para dermatofitos.

Dr. Peter Ihrke junto con éste servidor en el Latin American Veterinary Conference 2009

Dr. Louis Gotthelf: charla con calificativo de excelente, muy buen material audiovisual y conocimiento del tema en profundidad, pudo hacer una síntesis muy interesante entre los adelantos tecnológicos para un mejor estudio y el tratameinto del oído. Explicó las ventajas de la otoscopía digital y se metió al bolsillo a la audiencia cuando mostró en vivo su otoscopio conectado a su computadora personal. La calidad del equipo es notable, ergonómico, multifuncional, se puede esterilizar en autoclave y con un lente de aumento único que nos permite ver el tímpano con mucha claridad a muy corta distancia y con la posibilidad de observar a travez de la membrana timpánica para detectar otitis media. El equipo posee una entrada para pinzas endoscópicas, hisopos para toma de muestra y para rayo láser que permite perforar la membrana timpanica y realizar lavados o retirar quistes seruminosos o pólipos del canal externo. Aunque a mi parecer la tecnología láser aún está fuera del alcance de nuestra realidad creo que es muy importante estar al día con estos equipos para cuando nos encontremos listos para usarlos. Muy buenas recomendaciones de tratamientos para Malazzesia, Proteus, Pseudomona, Streptococcus y Estaphylococos. Las presentaciones del Dr. Gotthelf fueron seguidas desde las 10:00 am hasta las 4:00 pm con un respectivo break para almorzar. El motivo fue a mi parecer que a diferencia de los demás expositores, el Dr. Gotthelf presenta una sola gran charla contínua que resulta amena a pesar de la extención. Las preguntas de la audiencia fueron respondidas ampliamente, satisfaciendo a cada uno que presentaba una inquietud. Se debe recalcar que el Dr. Gotthef resaltó la importancia de los estudios citológicos, histopatológicos y cultivos para el correcto diagnóstico y tratamiento de los problemas de los oídos en caninos y felinos. Entre las expresiones que se alojaron en mi cabeza e ingresaron a lo más profundo de mi memoria para siempre me quedo con 02: "El 50% del los perros ha tenido otitis en algun momento de su vida" y la segunda "Los Cockers Spaniel con otitis leve o moderada siempre terminarán en el quirófano en algun momento de su vida, no hemos podido tratar exitosamente a ésta raza sin cirugía"

Dr. Louis Gotthelf

Dr. Michael Fry: realizó una presentación muy buena, muy didáctica aunque para ser completamente honestos con ustedes que leen éstas líneas creo que le faltó conexión con la audiencia. Su charla fue básica, sin novedades, con conceptos ya conocidos en hematología. Las charlas de anemia fueron un poco densas para la mayoría y para los que queríamos más, fue un poco chata, sin momentos para abrir mucho los ojos o apuntar los oídos al expositor. Recalcó la importancia de los reticulocitos y su estudio absoluto para detereminar el tipo de anemia, la importancia de ralizar conteos de reticulocitos agregata en felinos (descartando los punctata), causas de micrositosis eritrocitaria, presentó cuerpos de Heinz usando el New Methylene Blue y por más que yo trato de recordar algo más de anemia no lo consigo, es como explicaba al principio, no cautivó, no dejó algo para recordar. La charla de citología básica fue buena, a los que nos gusta mucho ésta parte de la patología clínica siempre vamos recibir con beneplácito imágenes de túmores de células epiteliales, redondas, y mesenquimales. Pude percibir una dedicación especial al Linfoma en comparación con otros tumores, presentó por primera vez en Lima una imagen de Linfoma de células pequeñas de bajo grado estudiado citológicamente, ésa fue para mi la parte más satisfactoria de la charla, fue gratificante ver la misma imagen que ví hace ya 10 años en un Scottish Terrier y que bauticé como Linfoma de Células en forma de Cometa (Comet Cell Linfoma). Algunas ideas que manifestó el Dr. Fry respecto a patologías que pueden crear controversia podrían ser la nececidad de realizar un estudio histopatológico para diagnosticar Carcinoma de Células Escamosas (CCE), en mi experiencia no se aplica en todos los casos y hay carcinomas cuyo diagnóstico es muy sencillo mediante estudios citológicos, una verdad a medias fue la expresión de que los Mastocitomas poco granulados no se tiñen bien con tinciones Diff Quick, ésto es cierto, lo que tambien es cierto es que un citólogo con experiencia y que tuvo la precaución de pedir más de tres láminas para estudio tendra oportunidad de ver algunas células con gránulos ténues pero granulos al fin lo que permitirá el diagnóstico de mastocitoma poco diferenciado. Para concluir con el Dr. Fry, tuve la oportunidad de conversar con él y resultó ser un excelente tipo, pero sus charlas (en mi opinión) no motivaron lo suficiente para tener cada día más patólogos clínicos en nuestro país. De igual forma debo expresar que no pude presenciar su charla de Desórdenes Leucocitoarios del día domingo aunque no escuché comentarios ni buenos ni malos.

Dr. Michael Fry

Dr. Edward Wreitschwerdt: aunque pronunciar su apellido aún me es dificil, sus charlas fueron amenas a pesar de lo complejo de los temas. Mostró el fruto de los estudios de su equipo de trabajo de la Universidad Estatal de Carolina del Norte respecto a la bartonelosis canina y humana. Dejó en claro que existen varios tipos de bartonelosis y que es aún una enfermedad que se necesita estudiar más pues sus métodos de contagio no son claros aún. Igulamente habló sobre la Bartonella henselae deslizando la posibilidad de transmisión de la enfermedad entre felinos y HUMANOS es a travez de vectores, especialmente la pulga. Las charlas de Erichiosis canina y Humana fue igualemente buena, centrada en nuestra Erlichia canis (monocítica) y desmitificando la idea que todos los perros con Erlichia son trombocitopénicos para lo cual presentó algunos casos clínicos. Muy buena charla en sínteisis.

El Dr. Clarke Atkins y el Dr. Richard LeCouteur realizaron sus charlas con la aprobación de la audiencia aunque no pude estar presente en muchas de ellas puedo decir que el Dr. LeCouteur se llevó las palmas y los comentarios como "...se pagó el curso con ésta charla" o otra mejor, "...ha venido el Michael Schumacher de la neurología". La expresiones hablan por si solas de la calidad del expositor.

La exhibición comercial fue acceptable, aunque un retroceso a mi parecer respecto a exhibiciones de años anteriores, espacio más reducido, pocos expositores y caras conocidas, casi familiares en todos los stands. El stand más dinámico fue el de Invetsa, el más elegante fue el de Pfizer, las chicas más lindas estuvieron por el stand de Mimaskot y que no se pique nadie..!!! El más extraño fue el de West Medica por su estilo de venta.

Sólo para terminar, quiero agregar que disfruté mucho el Latin American Veterinary Conference 2009, los que se lo perdieron, perdieron mucho pero aún pueden resarcirse acudiendo al Latin American Veterinary Conference 2010. Saludos a todos...y felicitaciones a todos los organizadores.

El Urianálisis

2009-09-16T07:30:00.000-07:00

Muchos Veterinarios desconocen la ultilidad del Urianálisis en la práctica de animales menores, en tanto otros conocen su potencial pero no lo usan por ser en algunos casos trabajoso y en otros por no tener que cargarle demasiado la cuenta al propietario de la mascota. El Dr. Ernesto Hutter, conocido médico veterinario Argentino califica al Urianálisis como la "quinta prueba semiológica" en base a su importancia y él mismo es capaz de diagnosticar más de veinte patologías a traves de un simple análisis de orina. Con ésto no estamos asegurando que el análisis de orina es "la respuesta", más bien, estamos tratando de aclarar su importancia en el diagnóstico de patologias post renales, renales y prerenales. En la experiencia del que escribe, he podido comprobar su inmensa importancia en la práctica de la clínica diaria y a la vez transmitir esta información a futuros colegas y propietarios de mascotas. A continuación procedo a detallar los materiales necesarios para realizar un correcto y completo urianálisis:

Fuente de agua

Sondas uretrales de los números 4, 6, y 8

Jeringas de 3, 5, 10 y 20 ml

Tubos de ensayo con 5ml de capacidad

Tubos de centrifugación

Porta objetos

Cubre objetos

Tiras reactivas(Combur Test, Mutistix, Chemstrip)

Ácido Nítrico, ácido sulfosalicílico

Guantes

Refractómetro para fluidos corporales

Microscopio con buena luz y objetivos

Opcionales

Sedistain (tinción para sedimento urinario)

Tinción de Wright

Diff Quick

Nuevo azul de metileno

Metodología para toma de muestras

El método que nos brinda una mejor muestra de orina para cualquier propósito es la cistocentesis o punción de la vejiga. La ubicación de la vejiga se puede concretar mediante base anatómica con palpación o mediante guia ecográfica. Se recomienda realizar esta prueba con vejiga llena y al realizar el examen de tira reactiva (Combur Test etc..) no prestar demasiada atención a los positivos débiles para sangre en orina pues durante la punción se puede producir un pequeño sangrado iatrogénico sin importancia pero que puede desviar la atención del que realiza la prueba. Retirar por lo menos 10 ml de orina de ser posible para realizar todas las pruebas. La sonda uretral es un procedimeinto simple y casi indoloro para los pacientes caninos machos y nos brinda una buena muestra aunque puede alterar los resultados de la proteinuria debido al arrastre de restos de semen y de igual forma proporciona una muestra no apta para cultivos urinarios por arrastre de bacterias de la uretra a la vejiga. El sondaje en las perras es más trabajoso y casi siempre requiere anestesia, sonda con mandril, frontoluz y espéculo. La técnica del chorro medio es otra forma de obtener la muestra de orina. La técnica del chorro medio consiste en colectar la orina al momento que el paciente esté realizando la miccion. Al igual que el sondaje, esta forma de colecta no es muy buena para la medición de proteínas y descalificada para el cultivo bacteriológico. En los pacientes felinos solo se recomienda la cistocentesis ya que el sondaje es muy dificultoso e incómodo para el paciente. No se debe realizar una cistocentésis en pacientes con diagnóstico presuntivo de piometra pues accidentalmente se puede punzar el útero y dejar escapar contenido séptico a la cavidad peritoneal y causar peritonitis séptica e incluso shock séptico.

Una vez obtenida la muestra sólo puede ser procesada antes de 02 horas pues luego de éste tiempo se producen cambios en el pH y cambios en la población de bacterias que pueden descomponer la orina. Existen preservantes para orina pero son de uso más especializado y la refrigeración a 8°C mantiene la orina por más horas pero deberá regresar a temperatura ambiente para la realización de las pruebas.

Examen de Tira Reactiva (Combur Test, etc...)

Las tiras reactivas nos brindan resultados para glucosa, bilirrubina, cuerpos cetónicos, gravedad específica, sangre en orina, pH, proteinas, urobilinógeno, nitritos, leucocitos y hemoglobina. Los resultados son colorimétricos, es decir, en base a los cambios de color e intesidad por reacciones químicas nos brinda una respuesta positiva o negativa y una posible cuantificación en base a la intensidad de la reacción. Es por esta razón que muestras de orina muy pigmentadas(bilirrubina, sangre, hemoglobina) deben ser centrifugadas antes de realizar la prueba para sedimentar el pigmento. Si a pesar de la centrifugación no se logra sedimentar el pigmento se deberá obviar el examen con tira reactiva.
Las tiras reactivas son muy útiles pero presentan serias limitantes para brindarnos resultados fidedignos para la bilirrubina, proteína y densidad urinaria. Es por está razón que se deberán realizar otras pruebas para estas tres pruebas específicas.

Prueba del anillo de Heller

Esta prueba nos permite determinar la presencia de proteínas en la orina más no es exacta en la cuantificación. Nos brinda sólo resultados positivos o negativos. Respecto a la tira reactiva, el examen de Heller es mucho más sensible para positivos a proteína y billirrubina. Para realizar la prueba se necesita llenar un tubo de ensayo con 2 ml de ácido nítrico concentrado sin que toque las paredes del tubo(usar una jeringa con aguja para éste propósito). Luego depositar 2 ml de orina en el mismo tubo. La orina DEBE bajar lentamente por las paredes del tubo para no crear turbulencia. Esperar 01 minuto y proceder a la lectura. Si se forma un anillo blanquesino lechoso en el centro del tubo el resultado será positivo a proteína. Si se forma un anillo verdoso por debajo del anillo de proteína será positivo a bilirrubina. Se debe recordar que un anillo positivo a bilirrubina en caninos no tiene importancia diagnóstica pero un anillo de bilirrubina en fellinos es siempre un patología. Los caninos con restos seminales en cantidad alta darán un resultado positvo a proteína, es por está razon que se recomienda realizar un frotis de orina y observarla al microscopio para buscar espermatozoides.

Densidad Urinaria y el refractómetro

Los riñones son órganos cuya función más importante es "concentrar orina", por lo tanto, si la orina se muestra diluída es porque algo anda mal en la función renal. La concentracion de orina es un proceso activo que demanda gasto de energía y no un proceso pasivo por lo cual, un riñon que no funciona dejará urea, creatinina, metabolitos nitrogenados y otras sustancias tóxicas en la sangre causando una azotemia. Tambien es importante recordar que sólo se observan signos clínicos de falla renal cuando el 70% de ambos riñones estan afectados, es por esta razón que no se debe desestimar la importancia de cambios en la densidad urinaria.

Para medir la densidad urinaria se requiere un refractómetro de fluidos corporales y si puede ser un refractómetro urinario veterinario específico es mucho mejor pues presentan mediciones para perros y gatos por separado. Hoy en día la mayoria de refractómetros vienen con un sistema de compensación de temperatura, pues la densidad urinaria (o gravedad específica) de la orina se ve afectada por la temperatura.

Para reallizar la medición de la densidad urinaria primero tenemos que asegurarnos que nuestro refractómetro se encuentra calibrado y ésto se logra usando unas gotas de agua destilada(su densidad deberá ser 1.000). Una vez realizado esto se debe proceder a limpiar el equipo y realizar la misma prueba con la orina. La densidad urinaria apropiada de los caninos es de 1.060 hasta el mínimo de 1.030 y en los felinos es de 1.080 hasta el mínimo de 1.040 (algunos gatos con falla renal pueden concentrar incluso hasta más de 1.045).

Examen directo

Una porción de orina fresca debe ser evaluada bajo el microscopio. Lo que se recomienda es centrifugar la orina por 15 minutos, retirar el sobrenadante y sólo evaluar el sedimento para la busqueda de cristales, cilindros y bacterias. Un gota extendida y seca mediante la técnica del frotis puede ser teñida para tener un mejor detalle de los componentes celulares (células epiteliales, inflamatorias, eritrocitos, espermatozoides) de la orina y para detectar bacterias. Las células neoplásicas también pueden ser analizadas con tinciones como el Diff Quick, Wright y nuevo azul de metileno.

Los datos obtenidos podemos integrarlos a los demás hallazgos semiológicos para poder llegar al diagnóstico. Si se obtienen resultados compatibles con falla renal se debe realizar un exámen de Nitrógeno Uréico en sangre.

Respecto a patologías específicas podemos conversar a traves de sus preguntas comentarios y opiniones, muchas gracias.

Plasmocitoma Extramedular

2009-08-25T09:49:00.000-07:00

Los plasmocitomas extramedulares son neoplasias que afectan a los caninos y en menor cantidad a los felinos. Son neoplasias que normalmente se presentan alopécicas, pequeñas, suaves, en caninos de edad avanzada y con mayor predisposición en razas grandes. Han sido reportados en el tracto gastrointestinal, piel, gingiva y lengua. Representan el 2% de las neoplasias cutáneas. Se denominan extramedulares cuando se presentan fuera del tejido óseo y su implicancia en el Myeloma múltiple aún es controversial. Se les conoce como tumoraciones benignas con una curación total en el 90% de los casos cuando son retirados quirúrgicamente siguiendo el protocolo oncológico (3 cm de margen en todas direcciones). Se mencionan algunos casos con metástasis a distancia, recurrencia e infiltración pero aún son pocos los reportes de malignidad.

Los plasmocitomas estan formados por Plasmocitos, células de origen linfoide que elaboran y almacenan los anticuerpos. Otros plasmocitos pueden ser formados igualmente en médula ósea partiendo de una célula precursora distinta a los linfocitos. En el ganglio linfático saludable y reactivo se les puede observar en su forma clásica de células redondas pequeñas con escaso citoplasma y una zona pálida perinuclear en el lado donde el citoplasma es más abundante. Éste espacio corresponde al aparato de Golgi. En oportunidades las células plasmáticas presentan vacuolaciones grandes con contenidos turquesas (cuerpos de russell) y toman el nombre de Células de Mott.

Fig. 1.- (Plasmocitos con criterios de malignidad que no presentan zona pálida característica. El núcleo periférico es evidente en todas las células. Diff Quik 45X)

La toma de muestra para los plasmocitomas no se diferencia de la toma de muestra de cualquier otra masa cutánea. La PAF (Punción con Aguja Fina) brinda excelentes resultados.

La muestra del plasmocitoma casi siempre es multicelular (se observan muchas células). La forma celular varía en cada tumor. Existen tumores formados por células con apariencia claramente plasmocitoide, es decir, células redondas de tamaño moderado con núcleo picnótico semiperiférico, citoplasma gris azulado, espacio pálido perinuclear en el lado con más citoplasma, y ausencia de cuerpos linfoglandulares. Algunos tumores presentan ejemplares celulares diferentes con multinucleación, mitosis, anisocitosis(diferentes tamaños de células) y anisocariosis(diferentes tamaños de núcleos) y ausencia de espacios pálidos perinucleares característicos de los plasmocitos. En la experiencia del autor, la única característica que se observa en casi todos los plasmocitomas es el núcleo semiperiférico.

Fig. 2.-(Plasmocitoma con típicos espacios pálidos perinucleares y núcleo semiperférico. Célula trinucleada-flecha. Diff Quik. 45X)

Algunos algoritmos de autores como Cowell o Baker no incluyen a los plasmocitomas como diagnósticos diferenciales debido a una supesta complejidad en su diagnóstico y recomiendan el estudio histopatológico e inmunohistoquímico para su diagnóstico.

La diferenciación del plasmocitoma con el myeloma múltiple mediante estudio citológico es casi imposible, pero la aparición de myeloma múltiple cutáneo es muy rara por lo que recomendamos no diagnosticar myeloma multiple mediante estudios citológicos en muestras de tumores cutáneos.

Semana movida

2009-08-25T08:46:00.000-07:00

Hola a todos,

debo extender mis disculpas pues luego de casi 20 días de ausencia virtual debido a que mi secretaria tomó sus merecidas vacaciones y tuve que asumir parte de sus funciones los saludo para informarles que el blog sigue y viene bien. Esta quincena tenemos novedades con especiales nuevos sobre Plasmocitoma y las herramientas para su diagnóstico. De igual forma extiendo mis disculpas al Dr. Marco Vega por no haber respondido una inquietud posteada hace algunas semanas respecto a desordenes linfocitarios. La respuesta será posteada en la brevedad posible Marco y gracias por la espera.

Estos días fríos, de parricidios, ambiciones y sicarios también han traído algunas buenas noticias (buenísimas diría yo..) como es la aparición de un nuevo laboratorio de patología clínica y microbiología. Desde esta redacción saludamos al laboratorio Vet Diagnostics y les auguramos muchos éxitos en éste fascinante campo. Aún su web site está inactivo pero esperamos que lo cuelguen pronto.

Quería contarles que algunas semanas malogré un celular y decidí comprar uno de estos celulares que les llaman Smart Phones ya que te permiten manejar tu agenda y estar conectado. Estoy seguro que más de uno piensa que ésta información no es compatible con Patología Veterinaria, ni siquiera con ciencias de la Salud, pero se equivocan. A todos los que tengan un celular con plataforma Palm, Windows Mobile, Blackberry y Iphone les recomiendo que descarguen el programa Epocrates, es un vademecum de medicina humana super completo, práctico y con muchas funciones, no se arrepentirán...y es gratis! Lástima que no exista un programa parecido en Medicna Veterinaria, pero lo esperamos. Para bajar el programa tienen que entrar al web site www.epocrates.com y bajarse el Epocrates RX free download. Más datos me los pueden preguntar a través del blog. Bueno, ahora voy a preparar los posteos para ésta semana, un abrazo a todos los miembros seguidores de nuestro blog. Demás esta decirles que somos un laboratorio de patología clínica y anatomopatológica que está para servir a todos los colegas del País.

Tumor de Células Basales: reto diagnóstico

2009-07-22T08:50:00.000-07:00

Canino Cocker Spaniel, hembra de 10 años. Se presenta a consulta con masa ulcerada, pendulante, sangrante de aproximadamente 2 cm. en el labio inferior izquierdo. Se procede a tomar una muestra por PAF (Punción por Aguja Fina) y extendido en lámina porta objeto mediante la técnica del "squash" y secado al aire libre. La muestra es remitida para estudio citológico el mismo día.
En el laboratorio se procedió a realizar tinción de Diff Quick y su observación en el microscopio con las siguientes imágenes:

(Fig. 01.- Grupo de celulas epiteliales basales. Nótese la tendencia a formar líneas laterales. Diff Quick. 45X)

Los tumores epiteliales de células basales son normalmente benignos pero pueden presentarse formas tumorales con un bajo grado de malignidad. El término de tumores de Células Basales es usado desde hace mucho para referirse a los tumores que se sospecha se originan en el estrato basal de la epidermis o sus estructuras anexas. Muchos subtipos de tumores de celulas basales han sido reclasificados luego del posterior estudio histopatológico en Tricoblastomas o carcinoma de células basales para reflejar su tendencia a mostrar difereciación folicular y su agresividad potencial respectivamente.

(Fig. 02.- Grupo de celulas basales con anisocitosis con macrocitosis, macrocariosis, anisocariosis, cromatina nuclear cordonada y densa, relacion nucleo citoplasma alta, amoldamiento. Diff Quick. 100X)

El termino "Tumor de celulas basales" sigue siendo usado para un tumor específico en el gato y puede ser diagnósticado citológicamente sin inconvenientes. En el caso de los caninos, la citología revela sus limitaciones debido a que sólo se puede diagnosticar al tumor de celulas basales como tal y no puede profundizar hacia el diangóstico de Tricoblastoma, Tricoepitelioma, Pilomatricoma, Cilindroma, entre otros. Para el diagnóstico definitivo aún necesitamos la histopatología. La frecuencia de los tumores de células basales es alta en gatos con 11% a 26% de prevalencia y moderada en perros con 4% a 12% de todos los tumores cutáneos. En la mayoría de casos, los citopatólogos encuentran las siguientes caratcterísticas en éste tipo de tumores:

Células cohesivas con tendencia a agruparse
Células que se alínean formando "lazos"
Células relativemente uniformes, pequeñas, redondeadas o cuboidales
Citoplasma basofílico azulado tenue
Relación Nucleo:Citoplasma alta (el núcleo ocupa una parte importante del toda la célula)
Núcleos redondos con cromatina cordonada

(Fig. 03.- Células basales dispersas con escasos signos de queratinización, citoplasma con angulaciones. Algunas formas redondeadas confunden hacia tumor de células redondas. Nótese los distintos tamaños de celulas y nucleos de células de un mismo tejido. Diff Quick. 45X)

Algunos investigadores manifiestan que los criterios se malignidad se ven en <30%>

El diagnóstico de los tumores de células basales tiene que realizarse paso a paso y aquí les damos una modesta técnica para su diagnóstico citológico. Lo más importante es trabajar con una buena muestra y ésto sólo se podrá lograr con varias punciones y varias láminas (recomendamos mínimo 6 láminas). Recuerden que sólo podemos evaluar lo que está en nuestras láminas y si la muestra no es suficiente o es demasiado hemorrágica tendremos que retomar la muestra. Una vez teñida debemos empezar con el objetivo de 4X para buscar zonas en las cuáles se observen grupos de más de 20 células que se tiñan de azul fuerte. Desde este objetivo las células sólo se apreciarán como puntos azules muy oscuros y muy pequeños. Una vez ubicado el grupo ideal debemos usar nuestro objetivo de 10X para determinar si las células forman grupos cohesivos y si en estos grupos observan células que se "alinean" una al lado de otra. Es como un juego de tres en raya pero las líneas pueden ser curvas y deben contar mas de 10 células alienadas para estar seguros. Si no son suficientes células debes volver al objetivo 4X para buscar otro grupo. Si ya encontraron varios grupos con varias células en fila pueden comenzar a usar el objetivo 45X y ver las características de las células, del citoplasma y núcleo por separados, contar los criterios de malignidad presentes. Por último, si las células presentan tres criterios de malignidad ya pueden diagnósticar TUMOR DE CÉLULAS BASALES. Si desean profundizar deben realizar una biopsia para remitirla a su laboratorio patológico de confianza.

(Fig. 04.- Macrocitosis. Célula tumoral gigante con macrocariosis y tres nucleólos. Nótese las características en color y textura que nos indican que es una célula del mismo tipo celular de las células más pequéñas. Diff Quick. 45X)

Semana movida

2009-07-22T07:54:00.000-07:00

Hola a todos los que leen nuestro blog de patología clínica veterinaria y bienvenidos a nuestra sección "Semana Movida". Las semanas previas a las elecciones para el Colegio Médico Departamental fueron movidas, muchos dimes y diretes, impugnaciones y por supuesto aportes para mejorar el sistema de elecciones de nuestros representantes. Ahora que tenemos nueva junta directiva debemos concentrarnos en otras cosas. Desde la redacción de éste modesto foro saludamos la elección del Dr. Fernando Chavez Zapata y a toda la Lista 2 por la victoria lograda en las últimas elecciones el domingo 19 último. Estamos seguros que ahora empieza un cambio importante no sólo en la institución sino en la forma como los veterinarios nos vemos a nosotros mismos.

El laboratorio trabajó mucho esta semana que pasó, es por eso que en las próximas horas estamos colgando nuevos casos e información respecto a tumores de celulas basales, mastocitomas poco diferenciados y carcinomas.

Nos encontramos en conversaciones con la Universidad Ricardo Palma, facultad de Medicina Veterinaria para que nos faciliten las fotos del curso de Veterinaria de Animales Menores que se desarrolló hace algunas semanas. El motivo es realizar una crónica del evento. Esperamos que todo siga viento en popa. Sin más me despido no sin antes desearles unas FELICES FIESTAS PATRIAS a todos los veterinarios, espero que salgan a conocer el Perú o a comer bien, como siempre se hace en nuestra tierra. Un abrazo fraterno...

2009-07-10T09:22:00.000-07:00

Pudy, sufrió un sangrado unilateral profuso hace algún tiempo y no presentaba lesión aparente. Informamos al propietario (un cirujano dentista) que los sangrados unilaterales suelen deberse en la mayoría de casos a tumores en el interior de la cavidad nasal y que era necesario tomar una muestra para estudio citológico e histopatológico. La foto fue tomada seis meses después de su primer sangrado. Al momento de la consulta, cómo realizarían la toma de muestra para estudio citológico y cómo realizarían la muestra para estudio histopatológico?? Esperamos sus aportes...

PD: recuerdeen que el paciente no tiene lesiones aparentes, sólo sangrado unilateral.

Semana movida

2009-07-07T07:52:00.000-07:00

Buenos días a todos los bloggeros veterinarios, a todos nuestros seguidores que aún no somos muchos, pero con el trabajo conjunto de todos haremos de éste blog el más importante en patología clínica veterinaria del Perú. Éstas semanas de tanto movimiento intransigente de peruanos que desean mantenernos en el subdesarrollo con paralizaciones sin sentido nos han brindado también muy buenas noticias. Con mucha alegría nos enteramos que la Veterinaria 922 de el Dr. Fabrizio Gavazzo y la Dra. Katy Pait abrió oficialmente sus puertas para servir a la comunidad barranquina en la Av. Grau #922. Desde nuestro laboratorio le auguramos muchos éxitos y esperamos colaborar con el crecimiento de su práctica privada dentro de nuestra especialidad. De igual forma tuve la oportunidad de conocer al Dr. Piero Ravina y al Dr. Juan Carlos Tong en su practica privada "4 Patas" en la Estancia de la Molina. Realizamos una toma de muestra para estudio citológico de un paciente con linfoadenopatía generalizada cuyos resultados mostramos en nuestro blog la semana que pasó y realizamos un estudio histopatológico en otro paciente. A todos les damos la bienvenida y agradecemos la confianza depositada en nosotros.

Damos igualmente una calurosa bienvenida a la Bachiller en Medicina Veterinaria, Dra. Sara Huaytalla a nuestro laboratorio. Ella se encuentra realizando una pasantía y le deseamos mucha suerte.

Bueno sin más me despido y les informo que deben estar atentos porque ésta semana estamos publicando nueva información con imágenes, a nuestro estilo. Saludos..!

Linfoma Linfoblástico

2009-07-02T11:39:00.000-07:00

Imagen X45 y X100 (inmersión). Paciente canino, golden retriever, macho de 9 años. Linfoadenopatía generalizada. Se realizó punción con aguja fina del ganglio poplíteo. Tinción 15 (Metanol, Xanténico, Tiazínico). Se observa que más del 50% de las células son linfoblástos. Se observan cuerpos linfoglandulares, linfocitos pequeños y eritrocitos. Dx: Linfoma Linfoblástico.

El Linfoma linfoblástico es un tipo de tumoración de diagnóstico frecuente en citología diganóstica. La confiabilidad de la prueba para éste tipo de tumor es muy alta para los patólogos clínicos con conocimientos de citología. El linfoblasto es un precursor linfoide, una célula grande con un citoplasma azulado característico, un gran núcleo semiperiférico que abarca casi la totalidad de la célula. Cuando la población de éstas celulas (Linfoblastos) representan más del 50% de la población linfoide, no se observan células plasmáticas y ni celulas de Mott, se diagnostica Linfoma Linfoblástico. El estudio histopatológico es opcional. Pregunta: En qué casos solicitarían un estudio histopatológico para un caso de linfoma o linfosarcoma???

PATOLOGIA CLINICA VETERINARIA: Citologia General Veterinaria

2009-06-27T13:47:00.000-07:00

PATOLOGIA CLINICA VETERINARIA: Citologia General Veterinaria

2009-06-27T09:18:00.000-07:00

LANZANDO IDEAS: quÉ les viene a la mente cuando ven ésta imagen de raspado cutáneo de un canino??? Participen...

ACTUALIZANDO

2009-06-26T11:44:00.000-07:00

Hola a todos,
el día de ayer compartimos una charla muy amena con los chicos de la Facultad de Medicina Veterinaria de la Universidad Ricardo Palma. La charla estuvo a cargo de quien escribe y hablamos sobre los tumores cutáneos y la citología como herramienta diagnóstica. Hubo mucha participación y la organización estuvo a la altura. Debo agradecer a los doctores Mauricio Jara, Franco Ceino, Beto Delgado y a todas la autoridades de la facultad por el evento y esperamos que se siga realizando todos los años. FELICITACIONES...!!
De igual forma la semana nos presentó casos interesantes en el laboratorio, próximamente estaremos colgando las fotos y artículos relacionados. De igual forma siempre esperamos su participación activa para poder hacer éste blog el más importante de su tipo. Mucha suerte para todos y recuerden que la suerte es 99% PERSEVERANCIA y 1% azar..

Pasión por el diagnóstico..!

2009-06-10T15:10:00.000-07:00

Mediante la presente el Laboratorio Patológico San Isidro los saluda y les da la bienvenida. Es para nosotros una gran satisfacción poner a disposición de su prestigiosa clínica nuestros servicios de patología veterinaria. Les recordamos que somos la empresa privada pionera en servicios integrales en patología con más de 6 años en el mercado brindando diagnósticos certeros, asesoramiento y logrando alianzas estratégicas con las clínicas que nos han brindado su confianza en estos años. Colaborar en el crecimiento de numerosas prácticas privadas y clínicas es algo que nos llena de orgullo y nos motiva a seguir al lado del colega veterinario, en su desarrollo profesional y económico. Esperamos que nuestros servicios colmen sus expectativas y siempre estamos dispuestos a escuchar sus sugerencias e inquietudes. Muchos éxitos..!!!

Bienvenidos...

2009-06-10T09:27:00.001-07:00

Bienvenidos a el blog...!